摘 要

雙歧桿菌是人體內(nèi)存在的一種生理性細(xì)菌，是人體有益菌中最值得重視和研究的一種，它與人體的健康密不可分，可以說是大自然賜予人類的健康法寶。雙歧桿菌的研究和生產(chǎn)具有很好的發(fā)展前景。
雙歧桿菌一般能從動物身上提取，豬的胃上皮細(xì)胞黏膜附有有大量雙歧桿菌。從豬的糞便中分離出雙歧桿菌，并將其擴(kuò)大生產(chǎn)。合適的生長條件對雙歧桿菌的生長速度、菌體形態(tài)、活菌數(shù)、代謝產(chǎn)物有良性的影響。因此通過研究，獲得雙歧桿菌生產(chǎn)的最優(yōu)工藝方案有非常重要的意義。

關(guān)鍵詞：雙歧桿菌 發(fā)酵工藝



目 錄

摘 要 I
ABSTRACT II
1引言 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 研究單位簡介..........................................1
1.2 雙歧桿菌的作用 2
1.2.1 改善人體腸道功能......................................2
1.2.2 恢復(fù)人體菌群平衡，形成抗菌生物屏障，維護(hù)人體健康......2
1.2.3 控制人體內(nèi)毒素的水平，保護(hù)肝臟病增強(qiáng)肝臟的解毒、排毒功能
............................................................2
1.2.4 降血脂作用，防止動脈硬化個高血壓.......................2
1.2.5 免疫調(diào)節(jié)作用...........................................3
1.2.6 營養(yǎng)作用...............................................3
1.2.7 提高SOD酶活力，消除人體自由基.........................3
1.2.8 抗腫瘤、預(yù)防癌癥.......................................4
1.3 研究意義.................................................4
1.3.1雙歧桿菌開發(fā)現(xiàn)狀........................................4
1.3.1.1 雙歧桿菌因子的開發(fā)與應(yīng)用 ............................4
1.3.1.2 雙歧桿菌營養(yǎng)液 ......................................4
1.3.1.3 新型酸奶的開發(fā)與應(yīng)用 ................................5
1.3.1.4 雙歧桿菌藥品的開發(fā)...................................5
1.3.2 雙歧桿菌生物工程展望...................................5
2 材料..................................................7
2.1樣品來源..................................................7
2.2主要實(shí)驗(yàn)試劑..............................................7
2.3主要儀器與設(shè)備............................................7
3 雙歧桿菌的分離和鑒定..................................8
3.1實(shí)驗(yàn)方法..................................................8
3.1.1 分離純化方法...........................................8
3.1.2 厭氧培養(yǎng)...............................................8
3.1.3 仔豬腸道雙歧桿菌的初步鑒定.............................8
3.2 本章小結(jié)............................................9
4仔豬腸道雙歧桿菌的生長特性研究 10
4.1 操作方法 10
4.1.1 試驗(yàn)方法 10
4.1.2 檢測方法 10
4.2 培養(yǎng)溫度 10
4.3 起始pH.............................................11
4.4 培養(yǎng)基的選定............................................12
4.4.1 碳源..................................................12
4.4.2 氮源..................................................12
4.4.3 生長因子..............................................12
4.5測定雙歧桿菌的生長曲線............................13
4.6 本章小結(jié).............................................15
5 雙歧桿菌發(fā)酵工藝條件的優(yōu)化研究........................16
5.1 雙歧桿菌制劑的生產(chǎn)工藝流程..............................16
5.2 發(fā)酵方案的確定..........................................16
5.3 厭氧發(fā)酵培養(yǎng)基組成及發(fā)酵條件的確定......................16
5.3.1 厭氧發(fā)酵的培養(yǎng)基組成..................................16
5.3.2 發(fā)酵控制條件..........................................16
5.4 發(fā)酵液活菌數(shù)的檢測......................................16
5.5 10L發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)試驗(yàn)..................................17
5.6 100L發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)試驗(yàn)................................18
5.7 本章小結(jié)...............................................18
6 結(jié)論與展望...............................................19
6.1 結(jié)論....................................................19
6.2 展望...............................................19
參考文獻(xiàn) 20
附錄I 培養(yǎng)基的配置 21
附錄II 雙歧桿菌的糖代謝途徑...........................22




引言
1.1 研究背景
雙歧桿菌屬（Bifodobacterium Orla-Jensen,1924）歸屬于放線菌門（Actinobacteria）放線菌綱（Actinobacteria）科里氏桿菌亞綱（Coriobacteridae）雙歧桿菌目（Bifidobacteriales）雙歧桿菌科（Bifidobacteriaceae）。
雙歧桿菌是人體內(nèi)存在的一種生理性細(xì)菌，是人體有益菌中最值得重視和研究的一種，它與人體的健康密不可分，可以說是大自然賜予人類的健康法寶。Tissier于1899年和1900年首先描述了分離自哺乳嬰兒糞便的一種革蘭氏陽性、彎曲和常見分叉的桿菌，命名為兩歧雙歧桿菌。
雙歧桿菌的細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)多種多樣：有短桿較規(guī)則或纖細(xì)狀帶有尖細(xì)末端的細(xì)胞，有呈球形的，也有長而稍彎曲的或呈各種分支或分叉形、棍棒狀或勺形。單個或鏈狀，V形、柵欄形排列或聚集成星狀。革蘭氏染色陽性，不抗酸，專性厭氧，無芽孢、莢膜或鞭毛，不運(yùn)動，觸媒隱形，硝酸鹽還原陰性，靛基質(zhì)陰性，明膠液化陰性，精氨酸水解陰性。最適生長溫度37~41℃，初始生長最適pH6.5~7.0。發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)生乳酸和醋酸。
到目前為止，已報道的雙歧桿菌有28個種。主要有青春雙歧桿菌（B.adolescentis）、長雙歧桿菌（B.longum）、兩歧雙歧桿菌（B.bifidus）、精華雙歧桿菌（B.essensis）、短雙歧桿菌（B.breve）、乳酸雙歧桿菌（B.lactis）、嬰兒雙歧桿菌（B.infantis）、側(cè)芽雙歧桿菌（B.laterosporus..