MXC對早期體內胚胎發(fā)育及生精細胞影響的設計

摘 要
本設計擬定以一種常見環(huán)境雌激素甲氧滴滴涕(methoxychlor, MXC)為例，來探討MXC對早期體內胚胎發(fā)育及生精細胞的影響。設計內容分為四部分：在體小鼠胚胎染毒模型建立的設計；MXC濃度對早期胚胎發(fā)育影響的設計；放射免疫法檢測MXC對E2和P含量影響的設計；MXC對雄性鼠生精細胞周期影響的設計。第一部分擬定設計通過在小鼠妊娠第12d經腹腔注射MXC，建立在體小鼠胚胎染毒模型，并設置對照組；第二部分通過注射不同濃度的MXC,觀察對小鼠胚胎生長發(fā)育的影響；第三部分設計為注射數日MXC后，提取孕鼠眼球血清來檢測對小鼠雌二醇（E2）和孕酮（P）含量變化的影響；第四部分設計為將注射MXC后的小鼠睪丸摘取，制備睪丸單細胞懸液，通過流式細胞術檢測MXC對生精細胞的影響。通過本次MXC對小鼠生殖系統(tǒng)影響的設計研究,為防治環(huán)境污染導致的胚胎毒性提供理論及實驗依據,及以后研究MXC至胚胎早熟及卵巢萎縮機制奠定基礎。

關鍵詞：環(huán)境雌激素；MXC；胚胎發(fā)育；生精細胞

目  錄
第一部分 文獻綜述
1.胚胎發(fā)育 1
1.1胚胎發(fā)育的概念 1
1.2胚胎發(fā)育過程 1
1.3胚胎發(fā)育基本模式 1
2. 環(huán)境雌激素簡介 2
2.1甲氧滴滴涕（MXC）簡介 2
2.2其它常見環(huán)境雌激素介紹及對人類生殖系統(tǒng)的危害 3
2.2.1人工合成環(huán)境雌激素雌激素 3
2.2.2工業(yè)類環(huán)境雌激素 3
2.2.3對人類生殖系統(tǒng)的危害 4
3. 流式細胞術簡介 4
3.1 流式細胞術工作原理及應用 5
3.1.1流式細胞術工作原理 5
3.1.2流式細胞術在檢測細胞周期中的應用 5
3.2流式細胞術主要構造 6
3.2.1流動室及液流驅動系統(tǒng) 6
3.2.2激光光源及光速成形系統(tǒng) 6
3.2.3光學系統(tǒng) 6
3.2.4 信號檢測與存儲分析系統(tǒng) 7
3.2.5 細胞分選系統(tǒng) 7
3.3流式細胞術展望 7
4.雌二醇（E2）和孕酮（P）對人體的調節(jié) 8
4.1雌二醇（E2） 8
4.2孕酮（P） 8
5.幾起由環(huán)境雌激素引發(fā)的環(huán)境污染事件. 9
第二部分 課程設計部分
1材料 10
1.1 實驗動物處理 10
1.2 實驗用的儀器 11
1.3 實驗試劑 11
2.方法 11
2.1 建立小鼠染毒模型 11
2.2制備睪丸單細胞懸液 11
3. 設計 12
3.1MXC對小鼠體質量的影響設計 12
3.2MXC對胚胎發(fā)育的影響設計 12
3.3MXC對血清中E2和P含量的影響設計 12
3.4MXC對生精細胞的影響設計 13
4.分析與總結 13
4.1 MXC對小鼠體質量的影響 13
4.2 MXC對胚胎發(fā)育的影響 13
4.3放免法檢測 MXC對血清中E2和P含量的影響 13
4.4流式細胞術檢測MXC對生精細胞周期的影響 14
5. 設計體會 14
參考文獻 16