10頁8000余字，包含完整畢業(yè)論文及答辯ppt
目錄
一、前言………………………………………………………………………3
（一） 硫元素與硫轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白…………………………………………………3
（二）硫轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究……………………………………………………4
（三）本實(shí)驗(yàn)的目的與意義…………………………………………………4
二、實(shí)驗(yàn)部分…………………………………………………………………4
（一） 材料、試劑和儀器…………………………………………………… 4
1.實(shí)驗(yàn)材料…………………………………………………………………4
2.菌株與質(zhì)?！?
3.主要生化試劑……………………………………………………………5
4.主要儀器…………………………………………………………………5
（二）實(shí)驗(yàn)方法…………………………………………………………………5
1.材料的準(zhǔn)備…………………………………………………………………5
2.目的片段的獲得……………………………………………………………5
（1） 總RNA的提取……………………………………………………………5
（2） 反轉(zhuǎn)錄…………………………………………………………………5
（3） 引物的設(shè)計(jì)……………………………………………………………5
（4） PCR擴(kuò)增獲得目的片段…………………………………………………6
3.目的基因的克隆：…………………………………………………………… 6
（1） 連接……………………………………………………………………6
（2） 感受態(tài)細(xì)胞的制備…………………………………………………… 6
（3） 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化……………………………………………………6
4.對轉(zhuǎn)化后細(xì)胞克隆的檢測篩選……………………………………………6
5.Northern雜交探針的標(biāo)記…………………………………………………6
6.斑點(diǎn)雜交檢測探針…………………………………………………………6
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果…………………………………………………………………7
1.目的片段的PCR擴(kuò)增…………………………………………………………7
2.目的片段的篩選……………………………………………………………7
3.斑點(diǎn)雜交的實(shí)驗(yàn)結(jié)果………………………………………………………8
四、討 論………………………………………………………………………8
參考文獻(xiàn)………………………………………………………………………9
致 謝………………………………………………………………………10

小麥硫轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因克隆
及Northern雜交探針的制備
摘要 從鄭引一號小麥的根組織中提取總RNA，利用RT-PCR的方法獲得目的片段，并將它克隆到了pGEM-T Easy克隆載體中，經(jīng)PCR、酶切、測序，確定獲得了目的基因的片斷。并利用現(xiàn)報(bào)道的其他小麥品種中硫轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因序列的比對信息確定出Northern雜交時(shí)所需的探針片段，然后用斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)，證明獲得了所需探針,為進(jìn)一步研究小麥中硫轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白提供有意義的理論依據(jù)。
關(guān)鍵詞 小麥，硫轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，基因克隆，Northern雜交

Abstract We distill the total RNA from the root of the wheat—zhengyin No.6. Then using the RT- PCR method to get the purpose gene segment. Combining it with the pGEM-T Easy vector to let it was cloned . it is was proved that we get the purpose gene segment after PCR, enzyme slice and the sequence-checking . And make use of the comparing information about the sequence of sulphate transporter gene in other species of wheat to find out our probe segment in Northern bloting, and did the northern-bloting experiment to make sure we get the needed probe For further study about thesulphate transporter in wheat.
Key words wheat；the gene of sulphate transporter；gene clone；Northern bloting