摘   要

   

    木糖醇是一種天然糖醇，被人體吸收無副作用，可作為蔗糖的替代品。此外，木糖醇被廣泛地應用于化學、醫(yī)藥工業(yè)等領域，其需求量在國內外日益增大。近年來，以資源富足的葡萄糖作為底物轉化生成木糖醇的微生物合成法受到人們重視。但其轉化效率不容樂觀，而木糖醇脫氫酶（XDH）是影響生物合成木糖醇的關鍵酶，對Gluconacetobacter diazotrophicus木糖醇脫氫酶基因進行分析和特點研究，可以為構建高活力XDH工程菌提供基礎。

論文以水果市場的普通甘蔗根部為材料，提取宏基因組，設計引物并通過PCR擴增G. diazotrophicus木糖醇脫氫酶基因，連接T載體并進行測序分析。分析結果顯示，所獲得的克隆基因長度約為800bp,與GenBank已報道的G. diazotrophicus PAl 5的木糖醇脫氫酶基因的序列相似度為99%;其氨基酸序列與GenBank 已報道的G. diazotrophicus PAl 5的脫氫酶的氨基酸序列相似度為99%；而與Gluconobacter oxydans 621H的木糖醇脫氫酶有74%的相似性。其中，起始密碼子是：ATG，終止密碼子為：TAA，序列包括3個潛在的ORF編碼信息，并發(fā)現(xiàn)不能切割此序列的常用限制性內切酶有Hind III，Nco I。同時，本研究對木糖醇脫氫酶的氨基酸序列進行了分析，結果顯示該酶含有二十種氨基酸