果莢發(fā)育突變體S12的大尺度定位

1.75萬字 42頁 原創(chuàng)作品，已通過查重系統(tǒng)

摘 要
擬南芥是十字花科植物是研究有花植物的遺傳、細(xì)胞、發(fā)育、分子生物學(xué)研究的模式植物。果莢是植物生殖與種子發(fā)育的重要器官，涉及植物發(fā)育最為重要的生物學(xué)過程。擬南芥很容易進(jìn)行人工誘變產(chǎn)生大量突變體所以我們利用擬南芥作為實(shí)驗(yàn)材料但是此類突變體分析必須利用圖位克隆才能確定突變體基因。
同線性測定是指測定目標(biāo)基因所屬的染色體。我們利用EMS誘變擬南芥Ler生態(tài)型，在M2中分離出果莢發(fā)育突變體S12。通過突變體與Col生態(tài)型進(jìn)行雜交利用F2代分離的突變體進(jìn)行基因定位，其中同線性測定是精細(xì)定位的第一步。通過F2代突變體混合DNA樣品分析初步確定該突變體和NGA63連鎖，但是需要進(jìn)行單株基因型檢測進(jìn)行確認(rèn)。我們擬用NGA63對F2分離的突變體單株進(jìn)行基因型檢測，判斷該突變體與NGA63連鎖是真實(shí)的。
隨后我們又選擇了A8103和A3925兩個(gè)分子標(biāo)記，在F2群體進(jìn)行單株基因型檢測發(fā)現(xiàn)S12突變體與三種分子標(biāo)記NGA63，A8103，A3925之間的交換率分別0%3.7%，0%。NGA63與A8103，NGA63與A3925以及A8103與A3925之間的物理距離分別為40cM3cM35cM，而實(shí)際檢測的交換率分別為6.25%，0%，6.25%。從結(jié)果發(fā)現(xiàn)實(shí)際檢測的交換率比理論值有所降低。由此可推斷，可能是檢測群體太?。画h(huán)境因素，沒有在最適條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如溫度過高或過低；突變體本身的原因，如突變頻率等原因造成的。此結(jié)果，會影響我們對S12突變體的定位，至于交換率為什么會降低，還有待進(jìn)一步研究。


關(guān)鍵詞：擬南芥；圖位克??；分子標(biāo)記；果莢發(fā)育